DuPont, 1802 yılında, Amerika Birleşik Devletleri'nde, Fransız Devrimi sırasında daha iyi bir hayat kurmak amacıyla Amerika'ya göç eden Eleuthére Irénée du Pont de Nemours adlı bir Fransız göçmeni, tarafından kurulmuştur. Fransa'da, ünlü kimyager Lavoisier'den kimya eğitimi alan genç DuPont, Wilmington, Delaware'de barut üretimi yapan bir fabrikayı kurarak işe başladı.
DuPont'un ilk ve sonraki bir çok yılında üretimini yaptığı ürün cephane ve madencilikte patlayıcı olarak kullanıldı. Bu mütevazi başlangıçtan sonra firma 19. yüzyıl'da zamanla büyüdü. Satın almalar ve büyüme dönemi ise 20. yüzyılın ilk yıllarında başladı.
20. Yüzyıl'ın başlarında, bilimsel araştırmalar yoluyla endüstriyel gelişmeye katkıda bulunmak amacıyla ilk "Deney İstasyonu" kuruldu. Tesis, DuPont'un ilk bilimsel laboratuvarı olmakla beraber, Neoprene®, Nylon ve Lycra® gibi önemli buluşlara ev sahipliği yapmış olan kurumdur. 1920'lerden itibaren araştırmaya oldukça önem veren DuPont'un günümüzde Araştırma & Geliştirme'ye ayırdığı bütçe yaklaşık 1.4 milyar dolardır.
1930'larda DuPont ilk olarak ticari başarı yakalayan sentetik kauçuk/lastik, neopreni ve materyal devrimini başlatan Nylon’u geliştirdi. 1960'lı yılların başında yapışmaz mutfak malzemesi kullanımıyla yıldızı parlayan Teflon®, 1938'de Roy Plunkett tarafından icat edildi.
Dünyanın bir çok yerinde kurduğu üretim tesisleri ve yönetim ofisleriyle büyümeye devam eden DuPont, 1999'da önemli bir yenilenme sürecinden geçerek, ana bilim platformlarından biri olarak biyolojiyi kimyaya ekledi ve yeni kurumsal kimliğini tanıttı: "Bilimin Mucizeleri" (The Miracles of Science®). Yeni kurumsal kimlik DuPont'un özünü anlatmakla beraber firmanın gelecek ile ilgili vaadini belirtmektedir. "Bilimin Mucizeleri", firmanın, daha iyi bir dünya için bilime dayalı çözümler sunan atılımları gerçekleştime yeteneğini temsil etmektedir.